醫事檢驗科

 細菌培養檢體收集、傳送、保存的操作指引

檢體種類 採集方法 容器最低檢體量 傳送
溫度/時間
保存
溫度/時間
運用限制 注意事項
Abscess 1.用無菌水或75%酒精清潔表面。
2.用針和空針抽取感染物質。
3.或以無菌空針打入無菌水再回抽檢體。
4.若所獲得的檢體不足時,再重複做一次。
棉枝輸送管
無菌塑膠管
無菌玻璃管
≦2h/RT ≦2h/RT 1天 1.棉枝檢體要求做Gram stain,需傳送兩支棉枝, 一支做培養一支做染色。
2.棉枝檢體要求做TB培養染色最好傳送>2支。
3.標示檢體種類尤其腦、肺、肝等的Abscess檢體。
Blood 1.75%酒精去除表面的污痕或油脂,然後待其完全乾。
2.用棉枝沾優碘由中心點劃圓圈,從中心點向外移,讓優碘乾(約2分鐘)。
3.再用75%酒精擦掉優碘,待其完全乾。
4.75%酒精擦拭血瓶瓶口完全乾,通常需要30-60秒。
5.先打到厭氧瓶再打到需氧瓶。
6.搖動血瓶,避免凝固。
血瓶種類:
成人血瓶≥ 8mL/套
小孩血瓶 ≥ 1mL/瓶

TB/Fungi culture請使用MYCO/F-Lytic血瓶(紅色)
24h/RT 24h/RT 1天 1.急性高燒必需馬上抗生素治療,治療前從不同部位連續抽兩套。(若要從同部位採檢須間隔至少30分鐘)
2.不明原因發燒、亞急性心內膜炎或持續性菌血症或黴菌血症,最多不超過三套。
3.接受抗生素治療的病人做血液培養,最適當的時候在抗生素濃度最低時。
4.不容易抽時,血液從catheter的部位抽血,則第二套血液培養必須自周邊的血液抽。
Bone Marrow 以外科手術方式收集檢體 血瓶≥ 8mL/套
(TB/Fungi culture請使用MYCO/F-Lytic血瓶)
無菌塑膠管
無菌玻璃管
≦24h/RT ≦24h/RT 1天 1.檢體量少可使用無菌玻璃管傳送。
2.由於收集過程複雜,所以比較可能造成污染。
3.主要培養特殊的致病菌,像是Brucella、Salmonella、Listeria、fungi和mycobacteria。
Body fluid種類:
Ascites
Joint fluid
Pleural effusion
Bile
CAPD
Pericardial
心包膜液
1.用酒精或優碘消毒穿刺的部位預防檢體污染或病人感染。
2.以針筒往皮下抽取肋膜,心包膜,腹膜,或關節液。
3.當申請使用血瓶採檢,分裝需氧或厭氧血瓶,留一些(0.5mL)做Gram’s stain。
4.或全部放入無菌容器,避免使用抗凝劑。
血瓶≥8mL/套
無菌塑膠(玻璃)管>1mL

TB culture請使用火箭筒離心管
馬上送
實驗室
≦24h/RT 1天 不可使用抗凝劑,有些菌種會被這些抗凝劑抑制。
Drain fluid 1.同Body fluid。
2.直接影像導引抽吸法
(Direct image-guided aspiration)
棉枝輸送管
無菌塑膠管
無菌玻璃管
<2h/RT ≦24h/RT 1天 1.放置超過2天的引流液會產生不正確的培養結果,可能會誤導治療。
2.不接受引流管。
檢體種類 採集方法 容器最低檢體量 傳送
溫度/時間
保存
溫度/時間
運用限制 注意事項
CSF 1.以iodine消毒穿刺的部位。
2.穿刺針插進L3-L4,L4-L5,L5-S1部位。
3.傳送第二支檢體做細菌檢查。
無菌塑膠管≥ 1mL 不可冷藏
馬上送
實驗室
<2h/RT NONE  
Dental 1.仔細清潔齒齦邊緣及表面,移除口水、殘渣。
2.小心刮取齒齦下的損傷物質。
3.放入棉枝輸送管。
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h/RT 1天 只做厭氧培養。
Endocervix 1.操作擴張器時不可使用潤滑劑。
2.使用棉枝先移除黏液及分泌物,將棉枝丟棄。
3.取一枝新棉枝深入子宮頸內採檢體。
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h/RT 1天 檢體不可以冷藏
Genital ( male ) 1.棉枝穿入尿道2-4 cm,旋轉棉枝2-3次。
2. for Gono:棉枝沾取分泌物。
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h/RT 1天 檢體不可以冷藏
Vaginal 1.先擦去舊的分泌物。
2.使用新的棉枝取最接近Vaginal黏膜的分泌物。
3.如果要做抹片需取第二支棉枝。
4.若培養GBS,不可使用擴張器採檢。
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h/RT 1天 檢體不可以冷藏
Tissue 收集主要損害部位組織或邊緣,避免取到壞死的老組織。 無菌塑膠管
無菌玻璃管
馬上送
實驗室
≦24h/RT NONE 1.只有組織穿刺無法獲得檢體時,才接受棉枝的檢體。
2.棉枝的檢體只有在傷口有感染跡象或慢性無法痊癒才接受。
Gastric lavegef 1.於早上未進食前或未離床前採檢。
2.使用鼻胃管進入胃中抽取胃液。
3.或打入無菌水25~50mL,再回抽檢體到無菌容器。
火箭筒離心管
TB culture請使用GJ-TB專用火箭筒離心管
馬上送
實驗室
≦24h/4℃ 1天  
檢體種類 採集方法 容器最低檢體量 傳送
溫度/時間
保存
溫度/時間
運用限制 注意事項
Nasal 1.給病人鼻內抗充血劑及局部麻醉劑。
2.確認中鼻道鄰近上頷竇一側抽吸。
3.以小棉棒從中鼻道收集引流液
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h,RT 1天  
Oral 1.使用棉枝移除傷口表皮分泌物及殘骸,棉枝丟掉。
2.另一棉枝沾取傷口,避免接觸正常組織。
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h/RT 1天  只做需氧培養
Throat 1.用壓舌板於舌頭上。
2.使用一枝棉枝塗抹於扁桃腺及懸壅垂之後,避開舌頭、口腔黏膜和懸壅垂。
3.轉動棉枝前後來回沾取後面的咽喉(Pharynx)、扁桃區域和任何發炎或分泌區域。
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h/RT 1天  
Ear 1.將無菌棉枝插入耳道直到遇到阻力。
2.轉動棉棒收集液體。
棉枝輸送管 <2h/RT ≦24h/4℃ 1天  
自咳痰
(Sputum)
1.收集檢體之前,病人要用無菌的生理食鹽水刷洗口腔或漱口。
2.不要咳出口水或鼻後的分泌物到容器內。
3.要深部咳出。
無菌塑膠瓶>1mL
TB culture請使用火箭筒離心管 (TB檢體至少3mL)
<2h/RT ≦24h/4℃ 1天 1.不接受收集24小時痰。
2.不可用衛生紙收集痰。
3.盡量收集早上晨第一口痰。
4.檢體運送延遲2小時以上沒冷藏,可能影響培養結果。
5.除非臨床有肺炎的存在(如發燒、發炎),氣管造口術才可用來做培養。
氣管內抽吸痰(Sputum) 抽到的檢體放到無菌容器。
氣管造口術(Sputum)
Bronchoalveolar lavage (B.A.L) 1.支氣管鏡進入呼吸道的內腔,灌入大量無菌水,(大於140C.C),檢體回抽含有遠端細支氣管和肺泡的分泌物。
2.最初收集的液體容易被污染需丟棄。
無菌塑膠管
無菌玻璃管
無菌塑膠瓶
<2h/RT ≦24h/4℃ 1天 延遲傳送超過1~2小時可能造成挑剔菌的流失,像S.pneumoniae及口鼻微生物叢過度生長。
Protected specimen
brushings
 (PSB)
1.經由支氣管鏡管道插入telescoping double catheter以polyethylene glycol塞住末端從呼吸道管壁。
2.放進一個小刷子,收集細胞間質。
3.小刷子放在1mL的無菌水裡。
無菌塑膠管
無菌玻璃管
<2h/RT ≦24h/4℃ 1天 1.延遲傳送超過1~2小時可能造成挑剔菌的流失,像S.pneumoniae及口鼻微生物菌叢過度生長。
檢體種類 採集方法 容器最低檢體量 傳送
溫度/時間
保存
溫度/時間
運用限制 注意事項
Eye 1.兩眼分別採檢,使用無菌水潤濕的棉枝在結膜或角膜滾動數次。
2.馬上接種於培養基上。
3.或放入棉枝輸送管。
4.若要做抹片,需另取檢體直接塗於抹片上1×2公分的範圍。
平板培養基
棉枝輸送管
培養皿
馬上送
實驗室

棉枝
<2h/RT
≦24h/RT 1天  
開放性傷口 1.用無菌生理鹽水徹底清洗傷口表面的區域,移走表面分泌物。
2.用解剖刀、棉棒、消毒紗布移走覆蓋於傷口的一些殘骸。
3.從損害的主要部位收集小組織或從邊緣刮取檢體。
4.當傷口相當乾,則使用兩支沾濕無菌水的棉枝採集檢體。
5.棉枝輕輕在傷口表面滾動大約五次,且集中於有化膿或有發炎組織跡象的位置。
棉枝輸送管
無菌塑膠管
無菌玻璃管
≦2h,RT ≦24h,RT 1天 1 棉枝檢體要求做Gram stain,則須傳送兩枝棉枝,一支做培養一支做染色。
2棉枝檢體要求做TB培養染色最好傳送>2支。
3不能培養≦12h動物咬傷傷口。
4標示檢體種,尤其腦、肺、肝等侵襲方式取得檢體。
5 標示解剖位置(臂、腿或左、右 等)。
6不接受用含有formalin的檢體。
1.用注射器和針頭抽取損害最深的部位的分泌物。
2.從損害的主要位置收集小組織或邊緣刮取檢體。
棉枝輸送管
無菌塑膠管
無菌玻璃管
≦2h,RT ≦24h,RT 1天
Semen 1.用肥皂清潔生殖器並擦拭乾淨。
2.將精液留於無菌塑膠瓶。
無菌塑膠瓶 <2h/RT ≦24h/RT 1天 檢體不可以冷藏
Tip
( I.V Catheter Tip )
1.在catheter移除前皮膚用75﹪酒精清潔。
2.拿著catheter露在外面那端,使用無菌的工具小心從病人身上移除,避免接觸皮膚。
3.拿著遠端放入無菌管內,以無菌剪刀剪tip約5公分放入無菌玻璃管內。
無菌塑膠管
無菌玻璃管
<2h/RT ≦2h/4℃ 1天 1.不接受導尿之catheter tip。
2.不接受catheter tip放在食鹽水或運送培養基中。
3.不接受從catheter部位採集的棉枝。假如有局部感染的症狀,傷口穿刺是較好的。
4.移除catheter前採集兩套血液培養,一套經catheter另一套經週邊部位,同時與catheter tip作培養。
檢體種類 採集方法 容器最低檢體量 傳送
溫度/時間
保存
溫度/時間
運用限制 注意事項
Stool(包含C.difficule culture) 1.病人應將大便放進一個乾淨、乾燥的容器。
2.傳送至少5mL的腹瀉大便,1g的大便或豆子大小的大便檢體裝於棉枝輸送管。
棉枝輸送管
無菌塑膠瓶
≦24h/RT ≦24h/4℃ 1天 1.拒收乾燥swab。
2.拒收stool 收集後沒放在棉枝輸送管>2 h。
3.不可用衛生紙收集檢體。
C.difficle GDH
and toxin
收集有黏液或液體,不成形的糞便。 無菌塑膠瓶>5mL or
1 g以上
≦ 2h /RT ≦24h/4℃ NONE 須新鮮糞便檢體送驗,不可加驗。
中段尿 指導病人開始排尿就不要停止,丟掉前段尿,直接使用無菌容器收集尿液。 無菌塑膠瓶≥ 1mL
無菌玻璃管≥ 1mL
 TB culture請使用火箭筒離心管至少10mL(40mL最適當)
<2h/RT ≦24h/4℃ 1天 1.儘可能於收集早晨第一次尿。尿液在膀胱內隔夜或至少4小時可減少偽陰性。
2.不可強迫病人攝取液體。過量液體攝取會稀釋尿液及降低菌落數<105 CFU ⁄ mL。
3.女性必需避開月經期。
4.不要收集便盆或尿壺裡的尿液。
5.只做需氧培養
存留導管尿 於導管入口處用酒精棉球清潔後,使用空針收集尿液,不可取導尿袋的尿液。
單次導管尿 1.單導的過程必須無菌技術操作,避免將微生物導入膀胱的風險。
2.先丟棄最初15至30mL的尿液,再收集尿液作培養。
恥骨穿刺 1.穿刺前膀胱必需充滿尿液並摸得出來。
2.膀胱上方的皮膚需剃毛及消毒。
3.使用空針穿刺抽取尿液。
適合於排尿困難之嬰兒,及懷疑厭氧菌感染。


 
10. 病毒檢體採取原則
10.1 病毒培養檢體
a) 咽喉標本(throat swab)
用無菌棉棒擦拭喉內扁桃腺及咽喉側部位,迅速將棉棒斷入採集瓶中,收集後瓶蓋旋緊。
b) 鼻腔,呼吸道標本(Nasal swab,Nasopharyngeal aspirate,Sputum)
Nasal swab用無菌棉棒擦拭鼻腔,迅速將棉棒斷入採集瓶中。Nasopharyngeal aspirate,Sputum,抽痰,迅速將管子斷入採集瓶中。收集後瓶蓋旋緊。
c) 眼液標本(Eye swab)
無菌棉棒先用生理食鹽水沾濕,再輕拭患部,迅速將棉棒斷入採集瓶中。收集後瓶蓋旋緊。
d) 直腸拭子(Rectal swab)
用無菌棉棒插入肛門5公分處,旋轉後取出,迅速將棉棒斷入採集瓶中。收集後瓶蓋旋緊。
e) 糞便標本(Stool)
收集新鮮糞便標本1-2gm放入無菌空瓶中送檢。
f) 尿液標本(尿液)
收集晨間第一次小便5-10ml,裝入無菌玻璃試管中。
g) 脊髓液標本(Cerebrospinal fluid)
用腰椎穿刺技術收集1-2mlCSF,裝入無菌玻璃試管,4℃運送。
h) 血液標本(Blood)
不常用來作病毒分離,如需用則抽血3-5ml裝有抗凝劑(EDTA)的無菌玻璃試管。
i) 皰液及患部刮取物(Vesicle fluid & Scraping)
先用75﹪酒精消毒患部表面,用26-27號針頭的針筒先抽0.1mL收集液,再抽疱液,然後注入收集瓶中。或者先刺破水皰,然後用棉棒沾取,再斷入採集瓶中。
j) 生殖道檢體

 尿道檢體(男性)
患者最好在採取檢體前一小時未解尿,將棉棒伸入尿道2-4公分。旋轉棉棒並取出,斷入採集瓶中。
 子宮頸檢體
將Exocervix以棉棒去除黏液,丟棄此棉棒。將另一支長棉棒伸入子宮頸之管道,直到整個棉花拭子看不到為止。旋轉棉棒5-10秒鐘,取出棉棒(勿接觸到陰道管壁),斷入採集瓶中。

10.2 病毒培養檢驗標本採檢及運送注意事項
a) 在發病初期(約五日以內),儘可能於兩個以上不同部位採集檢體。
b) 採檢後以冰浴(4℃運送)方式迅速送至檢驗科;若無法立即送檢時,可將檢體暫置於冰箱冷藏(2-8℃),於採檢後24小時內傳送至細菌或血清組處理。
c) 切勿將檢體置於冰箱冷凍層(-20℃或以下)保存,否則病毒不易培養。
d) 欲培養CMV,RSV之檢體須當天送檢,因CMV,RSV不穩定。
e) 病毒抗原檢體:最好採鼻咽抽出液(Nasopharyngeal aspirate)置入採集瓶中送至病毒室。
f) 血清抗體檢體:抽血3-5mL置入生化管中,儘可能取兩次檢體,即發病初期與二至三星期後(恢復期),以便於比較做為診斷。

11. 檢驗科各檢驗項目最低檢體量
11.1 為避免干擾檢驗結果,未達最低檢體量之檢體將予以退件處理。
11.2 各檢驗項目之最低檢體量及標準檢體量,請參照本手冊 四、各組作業規則內容